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檢測螢光素酶反應結果時是否需要選擇檢測波長？

相關產品目錄號：E1910,E1501,E2920,N1110,G7570,G8090

產品分類：螢光素酶報告基因技術及應用

問題類型：操作答疑

產品關鍵詞：螢光素酶報告基因檢測，儀器設置

螢光素酶檢測不需要選擇檢測波長的原因：

發光反應的檢測指標并不來自樣品本身。發光反應中檢測的光信號，是作為反應的副產物產生的。在螢光素酶反應中（生物發光反應），螢光素酶（例如螢火蟲螢光素酶，海腎螢光素酶或者NanoLuc?螢光素酶）催化底物轉化為產物，反應中的一部分能量，以光的形式釋放。我們檢測中用到的樣品，通常是真核生物來源的細胞、組織等等。


由于大多數真核生物不發光，通常來說，來自樣品自身的背景光非常低。這意味著，在螢光素酶檢測中不需要濾除來自樣品的任何光。螢光素酶反應的確會在某個特定波長下有最大的發光強度，但是螢光素酶反應的發光光譜通常都相當寬，在許多波長下都有發光。因此，如果只選擇在最大波長處檢測發光，過濾掉其他發光信號，意味著檢測會丟掉很多信號，丟失靈敏度。所以，實際上大多數發光檢測儀器會在檢測發光反應時收集整個可見光譜（大約為380–780 nm）中的所有光。這可以確保在檢測背景值低的同時有非常好的靈敏度。