常見問題FAQ

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螢光素酶檢測需要使用什么檢測板?

相關產品目錄號:E1910,E1501,E2920,N1110,G7570,G8090

產品分類:miRNA/siRNA研究技術

問題類型:產品選擇指導

產品關鍵詞:螢光素酶檢測,檢測板選擇

實驗室常用的檢測板類別

  • 全透明板(Clear plates
  • 全白色不透光平板(White Plates, Solid Bottom
  • 白色側壁透明底的平板(White Plates, Clear Bottom
  • 全黑色不透光平板(Black Plates, Solid Bottom
  • 黑色側壁透明底的平板(Black Plates, Clear Bottom


常見的實驗方案和選擇建議

螢光素酶反應(生物發光反應)產生的光來自樣品中發生的酶反應,不需要外來的光源激發,而且樣品中除了反應產生的光,沒有其他光源,背景低。對于發光反應,使用全透明板會有明顯的相鄰孔之間的信號干擾,不合適。另外四種板都可以避免大部分的孔間相互干擾,理論上都可以使用。相比之下,黑色的板會吸收光信號,降低背景(在發光反應中沒有必要),也降低檢測的靈敏度,不推薦。如果是使用發光與熒光檢測疊加的系統,使用黑板和白板都可以,但黑板的信號會比白板低大約一個數量級。透明底的孔板優勢是可以在實驗過程中觀察培養的細胞,全白板的優勢是靈敏度最高而且孔間相互干擾最小。以96孔板為例,常見的實驗方案和選擇建議如下:

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  • 在普通的透明細胞培養板中養細胞,加檢測試劑待細胞裂解后,把樣品轉移到全白檢測板中(如Corning #3912),這樣的板子價格便宜一些,但需要轉板,使操作變復雜且容易引入誤差。
  • 在底透明、壁不透光的細胞培養級的白板中培養細胞和檢測(如Corning #3903),這樣的板子可以方便的觀察細胞形態,進行發光檢測時可以在板子底部貼一張白紙或白色微孔板封板膜(Microplate Sealer)以降低孔
  • 與孔之間光信號的交叉干擾;
  • 在壁和底都不透光的細胞培養級的白板中培養細胞和檢測(如Corning #3917),這樣的板子無法觀察細胞狀態,對操作要求比較高。
  • 用于活細胞實時監測的發光反應,需要直接將活細胞接種在細胞培養級別的全白檢測板(如Corning #3917)或者白色透明底的平板(如Corning #3903)。

微孔板封板膜(Microplate Sealer)建議

*微孔板封板膜(Microplate Sealer)建議:

Nunc white polyester sealing tape???????????? Catalog Number 235305

USA Scientific Light reflecting film???????????? Catalog Number 2998-6550

Perkin Elmer white seals ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? Catalog Number 6005199

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